洗手液抗菌效果检测方法与标准

问：洗手液抗菌检测标准有哪些？洗手液抗菌效果如何检测？洗手液抗菌检测方法

答：

一、标准名称

1.GB19877.12005《特种洗手液》

2.GB388802020《儿童洗手液》

3.QB/T26542021《洗手液》

4.WS6282018《消毒产品卫生安全评价技术要求》

5.T/CAS5852022《抗菌洗手液》

二、标准内容

1.GB19877.12005《特种洗手液》

该标准适用于以表面活性剂为主体成分，添加抗菌剂的特种洗手液。抗菌指标要求：对大肠杆菌（*E.coli*ATCC8099）和金黄色葡萄球菌（*S.aureus*ATCC6538）的杀菌率≥90%（悬液定量杀菌试验，作用时间1分钟）；或抑菌环直径≥7mm（琼脂扩散法）。抗菌成分限制：氯己定类物质含量≤0.3%，酚类物质≤2.0%。此外，需通过急性经口毒性试验（LD50＞5000mg/kg）和多次皮肤刺激性试验（无刺激性）。

2.GB388802020《儿童洗手液》

针对儿童群体，标准严于普通洗手液。微生物指标：菌落总数≤100CFU/g，不得检出粪大肠菌群、铜绿假单胞菌等。抗菌效果：采用浸渍法检测，对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀菌率≥99.9%（作用时间0.5分钟）。安全性要求：急性经口毒性试验需达到实际无毒级（LD50＞5000mg/kg），眼刺激试验积分≤3分（无刺激性）。

3.QB/T26542021《洗手液》

区分普通型与抗菌型。抗菌型要求对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌（*C.albicans*ATCC10231）的抑菌率≥50%（振荡法，作用时间2小时）。稳定性测试：产品经54℃±2℃存放14天或25℃±2℃存放90天后，抗菌成分含量下降率≤10%，抑菌率仍需达标。此外，pH值需在4.010.0范围内，重金属（铅、砷、汞）限量符合化妆品标准。

4.WS6282018《消毒产品卫生安全评价技术要求》

适用于宣称抗菌/杀菌的消毒类洗手液。杀菌率要求：对目标菌（如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌）的杀菌率≥99.9%（悬液定量法，作用时间≤1分钟），并需通过中和剂鉴定试验（中和剂残留对试验无影响）。现场试验：模拟实际使用场景，洗手后手部自然菌减少率≥90%。毒理学指标包括皮肤刺激指数≤0.5（无刺激性）和致突变试验阴性。

5.T/CAS5852022《抗菌洗手液》

团体标准补充了模拟使用试验：受试者按标准流程洗手后，分别在立即和4小时后采样，手部菌落数需较使用前减少≥90%（立即）和≥50%（4小时）。自然菌杀灭率：使用后手部自然菌减少率≥90%。抗菌成分需符合《化妆品安全技术规范》，禁用三氯生、三氯卡班等限用物质。

三、检测方法

1.悬液定量杀菌试验

原理：将洗手液与菌悬液混合，作用规定时间后中和，接种培养计数存活菌数，计算杀菌率。

操作：

①制备菌悬液（浓度1×10⁸5×10⁸CFU/mL）；

②取0.5mL洗手液与0.5mL菌悬液混合，作用1分钟（GB19877.1）或0.5分钟（GB38880）；

③加入4mL中和剂（如含吐温80的磷酸盐缓冲液）终止反应；

④稀释后接种平板，37℃培养48小时，计数菌落。

评价标准：杀菌率=（对照组平均菌数试验组平均菌数）/对照组平均菌数×100%，需≥90%（GB19877.1）或≥99.9%（WS628）。

2.振荡法（抑菌率检测）

适用标准：QB/T26542021

操作：

①样品与菌悬液（1×10⁶5×10⁶CFU/mL）混合，37℃振荡培养2小时；

②稀释后接种平板，计算试验组与对照组菌数；

③抑菌率=（对照组平均菌数试验组平均菌数）/对照组平均菌数×100%，需≥50%。

3.模拟使用试验（T/CAS5852022）

步骤：

①受试者左手为试验组，右手为对照组，均不洗手3小时使自然菌定植；

②试验组用洗手液按“七步洗手法”洗手，对照组用清水；

③分别在洗手后0分钟和4小时采样，测定菌落数；

④计算即时减少率=（洗手前菌数洗手后菌数）/洗手前菌数×100%（需≥90%），4小时持续抑菌率=（4小时后菌数清水组4小时后菌数）/清水组4小时后菌数×100%（需≥50%）。

4.中和剂鉴定试验（WS6282018）

目的：验证中和剂能完全终止洗手液的抗菌作用，且对培养基无抑制。

组别设置：

①消毒剂+菌液→中和剂→培养（应无菌生长）；

②中和剂+菌液→培养（菌数应≥1×10⁶CFU/mL）；

③消毒剂+中和剂→培养（应无菌生长）；

④正常菌对照（菌液直接培养）；

⑤阴性对照（培养基）。

合格标准：①组无菌，②组菌数≥70%④组，③、⑤组无菌。

不同标准根据使用场景（如成人/儿童、普通/消毒）规定了差异化的检测方法与指标，检测时需根据产品宣称的功能选择对应标准，确保方法与评价体系的科学性和合规性。