食用冰致病菌检测方法（沙门氏菌 / 金黄色葡萄球菌筛查）

食用冰作为直接接触食品的介质，其卫生安全直接影响消费者健康。沙门氏菌和金黄色葡萄球菌是常见的食源性致病菌，可能引发严重肠胃疾病。聚检通第三方检测机构依据国家标准，采用科学方法对食用冰进行致病菌筛查。那么，如何准确检测这两种致病菌？不同方法的操作要点有哪些？下面聚检通小编将为大家介绍一下，帮助您做出明智的选择。  

一、沙门氏菌检测方法  

1. 增菌培养法  

操作方法：取25g食用冰样本加入缓冲蛋白胨水，36℃培养18小时。转接至TTB和SC增菌液，42℃二次增菌24小时。  

目的：扩大目标菌群数量，抑制杂菌干扰。  

作用：提高低浓度沙门氏菌检出率，检出限可达1CFU/25g。  

2. 选择性分离法  

操作方法：将增菌液划线接种于BS、XLD、HE三种琼脂平板，36℃培养24-48小时。  

目的：利用培养基特异性成分筛选目标菌落。  

作用：BS平板抑制革兰氏阳性菌，XLD平板通过菌落颜色区分沙门氏菌。  

3. 生化鉴定法  

操作方法：挑取可疑菌落进行TSI斜面试验、赖氨酸脱羧酶试验等5项生化反应。  

目的：验证菌株代谢特征是否符合沙门氏菌标准。  

作用：排除假阳性结果，准确率可达99.7%。  

4. 血清学检测法  

操作方法：用O多价和H因子血清进行玻片凝集试验。  

目的：确定菌体表面抗原结构。  

作用：最终确认沙门氏菌血清型，必要时进行脉冲场电泳分型。  

二、金黄色葡萄球菌检测方法  

1. Baird-Parker平板法  

操作方法：样本经7.5%氯化钠肉汤增菌后，涂布于B-P平板，36℃培养24-48小时。  

目的：利用卵黄亚碲酸钾抑制杂菌，促进葡萄球菌生长。  

作用：典型菌落呈黑色凸起，周围有透明溶血环，检出限10CFU/g。  

2. 血浆凝固酶试验  

操作方法：挑取可疑菌落与兔血浆混合，37℃水浴4小时观察凝固现象。  

目的：检测菌株致病性关键指标。  

作用：阳性结果可判定为产毒株，需进一步检测肠毒素。  

3. PCR快速检测法  

操作方法：提取细菌DNA，扩增nuc基因或ent毒素基因片段。  

目的：通过分子生物学手段特异性识别目标菌。  

作用：6小时内完成检测，灵敏度比培养法高100倍。  

4. 酶联免疫吸附法（ELISA）  

操作方法：使用抗SEA-SEE单克隆抗体包被微孔板检测肠毒素。  

目的：直接筛查毒素而非活菌。  

作用：适用于加工后食用冰的毒素残留检测，检测限0.5ng/g。  

三、检测质量控制要点  

1. 样品处理规范  

操作要点：无菌条件下破碎食用冰样本，检测前保持0-4℃保存。  

目的：防止样本交叉污染或菌群变化。  

作用：确保检测结果代表实际卫生状况。  

2. 方法验证要求  

操作要点：每批次检测需同步进行阳性对照和空白对照。  

目的：监控培养基有效性及操作无菌性。  

作用：符合CNAS-CL01:2018认可准则要求。  

3. 数据判读标准  

操作要点：沙门氏菌在选择性平板上需同时符合2种以上特征。  

目的：避免将变形杆菌等干扰菌误判。  

作用：确保报告结论的准确性。  

以上就是关于食用冰致病菌检测方法的全部内容，聚检通第三方检测机构拥有CMA认证实验室，配备全自动微生物鉴定系统，可为食品企业提供符合GB 4789.4-2016等标准的专业检测服务。