儿茶检测标准及高效液相色谱法检测流程

问：儿茶检测标准有哪些？高效液相色谱法如何检测儿茶成分？

答：

一、儿茶检测相关标准

1.GB/T303762020《茶叶中铁、锰、铜、锌、钙、镁、钾、钠、磷、硫的测定》

2.NY/T21032011《植物源食品中多酚类物质含量的测定》

3.HG/T45782013《工业用儿茶素》

4.SN/T45822016《进出口茶叶中儿茶素类物质的测定高效液相色谱法》

5.GB316372016《食品安全国家标准茶多酚》

二、标准内容详细说明

一、GB/T303762020《茶叶中铁、锰、铜、锌、钙、镁、钾、钠、磷、硫的测定》

该标准规定了茶叶中10种矿物质元素的电感耦合等离子体发射光谱（ICPOES）测定方法，适用于儿茶原料中矿质元素的限量控制。标准要求样品经硝酸高氯酸消解后，通过ICPOES测定各元素含量，检出限为0.1~5.0mg/kg，精密度（RSD）≤5%。例如，儿茶中钾含量应≥1.5%，钠含量≤200mg/kg，以保证产品矿物质组成符合食品安全要求。

二、NY/T21032011《植物源食品中多酚类物质含量的测定》

标准针对植物源食品（包括儿茶）中的多酚类物质，采用高效液相色谱法（HPLC）测定儿茶素、表儿茶素等成分。方法使用C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇0.1%磷酸溶液（梯度洗脱），检测波长280nm。线性范围为0.01~1.0mg/mL，加标回收率为95%~105%。标准明确儿茶中总多酚含量应≥25%，单个儿茶素类成分（如表儿茶素）≥5%。

三、HG/T45782013《工业用儿茶素》

该标准适用于工业提取的儿茶素产品，规定了外观、含量、干燥失重、灰分等指标。其中，儿茶素含量（HPLC法）≥90%，干燥失重≤5.0%，灰分≤1.0%。色谱条件：C18柱（150mm×4.6mm，5μm），流动相为乙腈0.1%磷酸溶液（20:80，V/V），检测波长278nm，进样量10μL，柱温30℃。标准还要求重金属（Pb）≤5mg/kg，砷（As）≤2mg/kg。

四、SN/T45822016《进出口茶叶中儿茶素类物质的测定高效液相色谱法》

针对进出口茶叶及儿茶制品，标准采用HPLCUV法测定8种儿茶素类物质（如儿茶素、表儿茶素、没食子酸儿茶素等）。样品经70%甲醇超声提取，离心后过0.45μm滤膜。色谱柱为C18（250mm×4.6mm，5μm），流动相A为水乙酸（99:1），流动相B为乙腈，梯度洗脱程序：0~10min，B相5%~20%；10~20min，B相20%~30%。检测波长278nm，方法检出限为0.5mg/kg，适用于进出口贸易中的质量仲裁。

五、GB316372016《食品安全国家标准茶多酚》

标准规定了食品添加剂茶多酚的质量要求，采用福林酚比色法测定总茶多酚含量，同时附录A提供HPLC法测定儿茶素单体。HPLC条件：C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇0.4%乙酸溶液（20:80，V/V），检测波长278nm。标准要求茶多酚中儿茶素总量≥50%，其中表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）≥20%，水分≤6.0%，砷≤1.0mg/kg，铅≤2.0mg/kg。

三、高效液相色谱法检测流程

1.原理

利用儿茶素类物质在C18色谱柱上的疏水性差异，通过甲醇水酸体系流动相进行梯度洗脱，结合紫外检测器（278nm）定量分析目标成分。

2.试剂与材料

标准品：儿茶素（Catechin）、表儿茶素（Epicatechin），纯度≥98%。

试剂：甲醇（色谱纯）、磷酸（优级纯）、超纯水。

样品：儿茶粉末（过40目筛），精确称取0.5000g。

3.仪器设备

高效液相色谱仪（配紫外检测器）

色谱柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm）

超声波清洗器、离心机（≥10000r/min）、微孔滤膜（0.45μm）

4.色谱条件

流动相A：0.1%磷酸水溶液

流动相B：甲醇

梯度程序：0~15min，B相10%→30%；15~20min，B相30%→10%

流速：1.0mL/min

柱温：35℃

进样量：10μL

5.样品处理

1.提取：样品加50mL70%甲醇，超声提取30min，冷却后定容至100mL。

2.离心：4000r/min离心10min，取上清液过0.45μm滤膜。

6.测定步骤

标准曲线绘制：配制0.05、0.1、0.5、1.0、2.0mg/mL标准溶液，依次进样，以峰面积对浓度拟合线性方程（R²≥0.999）。

样品测定：注入处理后的样品溶液，记录目标峰保留时间和峰面积，根据标准曲线计算含量。

7.结果计算

儿茶素含量（%）=（C×V×D）/(m×10⁶)×100

式中：C为样品浓度（μg/mL），V为定容体积（mL），D为稀释倍数，m为样品质量（g）。

8.方法验证

精密度：同一溶液重复进样6次，RSD≤2%。

回收率：加标水平为0.5、1.0、2.0mg/g时，回收率95%~102%。

上述标准与检测流程覆盖了儿茶从原料到成品的全链条质量控制，HPLC法因高灵敏度和特异性成为儿茶素类物质检测的主流技术，可有效支撑产品研发、质量监管及贸易合规性要求。