藿香高效液相色谱（HPLC）检测方法及标准

问：藿香HPLC检测方法有哪些国家标准？如何建立藿香高效液相色谱检测标准？

答：

一、标准名称

1. GB 23200.113-2018 食品安全国家标准 植物源性食品中藿香苷的测定 高效液相色谱法

2. YY/T 1460-2016 中药饮片质量检测技术规范 藿香项下高效液相色谱法

3. T/CACM 1021.32-2019 中药材及饮片质量标准 藿香叶

4. CP 2020 中华人民共和国药典 四部 通则0512 高效液相色谱法

5. GB/T 31773-2015 中药材检测方法通则 液相色谱法

二、标准内容

1. GB 23200.113-2018明确规定了植物源性食品中藿香苷的HPLC检测方法：采用C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（22:78），流速1.0 mL/min，检测波长330 nm，柱温30℃。规定线性范围0.05-10 μg/mL，检出限0.01 mg/kg。

2. YY/T 1460-2016要求藿香饮片检测需满足以下参数：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18（4.6×250 mm，5 μm），流动相梯度洗脱程序为0-20 min乙腈比例从20%升至35%，检测波长254 nm。规定百秋李醇含量不得低于0.25%。

3. T/CACM 1021.32-2019规定藿香叶的HPLC检测需测定迷迭香酸含量，色谱条件为：柱温35℃，流速0.8 mL/min，进样量10 μL。明确要求迷迭香酸峰的理论塔板数应不低于5000，分离度＞1.5。

4. CP 2020通则0512作为基础方法标准，规定HPLC系统适用性要求：理论塔板数按藿香苷峰计算应≥3000，拖尾因子0.95-1.05，重复性RSD≤2.0%。明确保留时间偏差应＜±5%。

5. GB/T 31773-2015规定中药材HPLC检测通用要求：色谱柱填充剂粒径应为3-10 μm，检测器噪声≤5×10-5 AU，漂移≤5×10-4 AU/h。要求标准溶液连续进样5次，峰面积RSD≤1.5%。

三、检测设备

1. 高效液相色谱仪：配备四元梯度泵、柱温箱及DAD检测器，检测波长范围190-900 nm，流量精度≤0.3%RSD，温控精度±0.3℃。推荐配置自动进样器，进样精度≤0.5%RSD。

2. 色谱柱：反相C18色谱柱，规格需符合4.6 mm×150-250 mm，粒径3-5 μm，pH耐受范围1.0-12.0。柱效要求≥15000 plates/m（萘标准品测试）。

3. 样品前处理设备：包括0.22 μm微孔滤膜过滤器、超声波提取仪（频率40 kHz，功率500 W）、离心机（转速≥8000 rpm）及分析天平（精度0.0001 g）。

4. 数据系统：色谱工作站需具备自动积分功能，积分参数设置应符合JJG 705-2014要求。保留时间重复性应达到±0.1 min内，峰面积精密度≤1.0%RSD。

5. 辅助设备：流动相真空脱气装置（残余气体含量＜0.5%）、柱后衍生装置（选配）以及在线过滤器（2 μm孔径）。所有设备均需通过计量认证，具有有效的校准证书。