问:污泥中大肠菌群和蛔虫卵检测的国家标准有哪些?
答:
一、标准名称
1. GB 18918-2002《城镇污水处理厂污染物排放标准》
2. CJ/T 221-2005《城市污水处理厂污泥检验方法》
3. HJ/T 299-2007《固体废物 浸出毒性浸出方法 硫酸硝酸法》(附录微生物检测)
4. GB 7959-2012《粪便无害化卫生要求》
5. HJ 348-2007《清洁生产标准 造纸工业(废纸制浆)》
二、标准内容
1. GB 18918-2002《城镇污水处理厂污染物排放标准》
第4.3条明确规定污泥农用时的微生物限值:粪大肠菌群值应≤0.01(以MPN/g干污泥计),蛔虫卵死亡率需≥95%。附录B规定了蛔虫卵检测的显微镜直接计数法,要求取10g湿污泥样本经梯度稀释后,采用饱和硝酸钠溶液浮聚法分离虫卵,并在25℃恒温培养箱中观察存活状态。
2. CJ/T 221-2005《城市污水处理厂污泥检验方法》
第7章"寄生虫卵测定"规定使用改良加藤厚涂片法检测蛔虫卵,要求样本预处理需经过40目筛过滤后,取1g样品与10%氢氧化钠溶液混合振荡30分钟。大肠菌群检测依据第5章的多管发酵法,采用3个稀释梯度(10⁻¹、10⁻²、10⁻³),每梯度接种5管乳糖蛋白胨培养液,培养温度(36±1)℃,时长(48±2)h。
3. HJ/T 299-2007《固体废物 浸出毒性浸出方法 硫酸硝酸法》
附录C补充了污泥浸出液中微生物检测要求:蛔虫卵检测需采用离心沉淀法,离心机转速设定为3000r/min,离心时间15min;大肠菌群检测采用滤膜法,使用孔径0.45μm的滤膜,滤液量控制在100mL,培养温度44.5℃±0.5℃。
4. GB 7959-2012《粪便无害化卫生要求》
表2规定污泥处理后的卫生指标:蛔虫卵含量需<1个/4g总固体,活卵率≤3%;粪大肠菌群值≥0.1。第5.2条要求蛔虫卵检测需进行胚胎培养试验,在28℃恒温条件下培养21天后观察发育情况。
5. HJ 348-2007《清洁生产标准 造纸工业(废纸制浆)》
表4中明确废水处理污泥的微生物控制指标:粪大肠菌群≤1000MPN/kg干固体,蛔虫卵灭活率应达到99.9%以上。检测时需采用平行样检测法,每个样品至少设置3个平行样,相对偏差不超过15%。
三、检测方法
多管发酵法在CJ/T 221-2005中规定具体操作流程:
(1)样品预处理:取10g湿污泥加入90mL无菌生理盐水,均质后静置30min
(2)梯度稀释:制备10⁻¹至10⁻⁶系列稀释液
(3)初发酵:每个稀释度接种3管EC培养液,44.5℃培养24h
(4)复发酵:取产气管转接至EC肉汤,同条件培养48h
(5)结果计算:按MPN表换算菌群值,精确至三位有效数字
关键设备包括:高压灭菌器(121℃/30min)、恒温培养箱(精度±0.5℃)、无菌均质器(转速≥8000r/min)。实验需在生物安全二级实验室进行,废弃物需经121℃灭菌30分钟后处置。