酱腌菜作为传统食品,其安全性备受关注。苯甲酸和山梨酸是常用的防腐剂,过量摄入可能危害健康。聚检通第三方检测机构采用高效液相色谱法(HPLC)精准测定其含量,确保食品合规性。那么,如何通过HPLC技术实现快速检测?不同样品前处理方法对结果有何影响?下面聚检通小编将为大家介绍一下,帮助您做出明智的选择。
一、高效液相色谱法(HPLC)检测原理
1. 方法原理
HPLC基于物质在固定相和流动相间的分配差异实现分离。苯甲酸和山梨酸在C18色谱柱上保留,经紫外检测器定量分析。
2. 仪器条件
色谱柱选用5μm C18柱(250mm×4.6mm)。流动相为甲醇-0.02mol/L乙酸铵溶液(5:95)。检测波长230nm,流速1.0mL/min。
二、样品前处理方法
1. 提取步骤
称取5g样品于50mL离心管,加入25mL甲醇。超声提取15分钟后,10000r/min离心5分钟。上清液经0.45μm滤膜过滤待测。
2. 净化处理
复杂基质样品需通过HLB固相萃取柱净化。依次用5mL甲醇、5mL水活化后上样,5mL水淋洗,最后5mL甲醇洗脱。
三、标准溶液配制
1. 标准储备液
准确称取苯甲酸、山梨酸标准品各0.1g,甲醇定容至100mL。4℃避光保存,有效期3个月。
2. 标准曲线制作
分别配制0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μg/mL系列标准溶液。以峰面积对浓度作标准曲线,相关系数应≥0.999。
四、方法验证参数
1. 精密度试验
同一样品连续测定6次,RSD<3%。不同日期重复测定,RSD<5%。
2. 回收率测试
加标水平为1.0、2.0、5.0mg/kg时,回收率范围85%-105%。方法检出限0.2mg/kg,定量限0.5mg/kg。
五、干扰因素控制
1. pH值影响
样品提取时需调节pH至2-3,确保酸性防腐剂完全解离。采用0.1mol/L盐酸调节。
2. 基质效应
通过标准加入法消除基质干扰。每批样品需同步测定加标回收率。
六、结果分析与判定
1. 定量计算
采用外标法按峰面积定量。超出线性范围时需稀释后重新测定。
2. 合规性判定
依据GB2760-2014标准,酱腌菜中苯甲酸≤0.5g/kg,山梨酸≤0.3g/kg。
以上就是关于酱腌菜中苯甲酸、山梨酸HPLC检测方法的全部内容,聚检通第三方检测机构拥有CMA/CNAS双认证实验室,配备Agilent 1260 Infinity II等先进设备,年检测样品超10万批次,数据准确可靠。