草酸含量高效液相色谱（HPLC）检测标准

问：草酸含量检测HPLC国家标准有哪些？如何操作？

答：

一、标准名称

1. GB/T 22244-2008《食品中草酸的测定 高效液相色谱法》

2. QB/T 5196-2017《果蔬制品中草酸含量的测定 高效液相色谱法》

3. SN/T 3856-2014《出口食品中草酸的测定 液相色谱法》

4. NY/T 1723-2009《蔬菜中草酸的测定 高效液相色谱法》

5. LS/T 6120-2017《粮油检验 谷物中草酸含量的测定 高效液相色谱法》

二、标准内容

1. GB/T 22244-2008

适用范围为食品中草酸含量的定量检测。该标准规定使用C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（pH 2.5）-甲醇（97:3），流速1.0 mL/min，检测波长210 nm。样品需经水提取、离心、过滤后进样，定量限为0.5 mg/kg。

2. QB/T 5196-2017

针对果蔬制品（如果汁、果酱、干制品）的草酸检测。色谱条件与GB/T 22244-2008一致，但样品前处理要求采用超声辅助提取，提取时间30 min。标准规定线性范围0.5-50 μg/mL，回收率需≥85%，重复性RSD≤5%。

3. SN/T 3856-2014

适用于出口食品（包括乳制品、饮料等）。流动相调整为0.02 mol/L磷酸二氢钾（pH 2.8）-乙腈（95:5），柱温30℃，进样量10 μL。要求样品经盐酸酸化后沸水浴提取，固相萃取柱净化，方法检出限为0.2 mg/kg。

4. NY/T 1723-2009

专用于蔬菜中草酸检测，强调新鲜样品需匀浆后加入5%三氯乙酸沉淀蛋白，离心取上清液过0.45 μm滤膜。色谱条件同GB/T 22244-2008，但规定标准曲线相关系数r≥0.999，定量计算采用外标法。

5. LS/T 6120-2017

针对谷物类样品（如小麦、大米），规定样品需粉碎过60目筛，采用0.1 mol/L盐酸振荡提取2 h，离心后调节pH至中性。色谱柱为C18（150 mm×4.6 mm，3 μm），流动相流速0.8 mL/min，检测波长210 nm，方法精密度RSD≤3%。

三、检测流程

1. 样品制备：根据样品类型（固体/液体）进行粉碎、匀浆或直接取液。固体样品需加入提取剂（如水、盐酸）振荡或超声提取，离心后取上清液。

2. 净化处理：部分基质复杂样品需过固相萃取柱或滤膜（0.22-0.45 μm）去除杂质。

3. 色谱条件设置：按标准要求配置流动相，平衡色谱柱至基线稳定，设置检测器波长、柱温及流速。

4. 进样分析：采用自动进样器注入10-20 μL待测液，记录保留时间及峰面积。

5. 数据处理：通过标准曲线法计算草酸浓度，需验证线性范围（R²≥0.995）、加标回收率（80-110%）及重复性（RSD≤5%）。

6. 结果报告：依据标准判定是否超标，并附色谱图、原始数据及质控记录。